El material biológico (pseudobulbos in vitro)
fue producidos en el Laboratorio de Biotecnología, del Instituto Tecnológico de
Mérida. Se procedió a deshidratarlos en
campana de flujo laminar a temperatura ambiente. Al realizar la maceración sólido-líquido durante 72 h, se
utilizaron 3 solventes de manera individual: metanol, etanol y agua estéril, en
relación de 1:20 (mg pseudobulbo deshidratado:μl solvente). Las muestras trabajadas fueron: pseudobulbos
obtenidos por organogénesis indirecta, pseudobulbos obtenidos a partir de
organogénesis directa, ambos producidos in
vitro y deshidratados, igualmente pseudobulbos producidos ex vitro. Se corrió la
cromatografía en capa fina (CCF) usando como
fase móvil Acetato de etilo:Metanol:Agua
(100:13.5:60). Los diferentes extractos obtenidos de pseudobulbos in vitro
y ex vitro se inyectaron en placas de CCF de 10x10cm. Fueron reveladas usando luz UV de longitud de onda larga y
corta.
Se calcularon los distintos Rf de las
bandas obtenidas de los extractos con los diferentes solventes de maceración.
De acuerdo al número de bandas presentes, se observó que el mejor solvente a
Temperatura (T) ambiente, para obtener el mayor número de bandas visibles fue
el agua estéril con un total de 4 bandas. Al probar el tratamiento agua a T de
100 °C como solvente de extracción durante 15 min antes del macerado, se detectaron
dos bandas tanto en pseudobulbo producido in
vitro como en ex vitro. Se comparó
el efecto que causaba el almacenamiento en congelación de las muestras, encontrándose
que no existe variación en los compuestos presentes en muestras frescas y
muestras almacenadas en las condiciones y muestras comparadas,
