Luz Margarita Morales Couoh
Ingeniera Bioquímica
Tesis Profesional
Resumen:
El objetivo del
presente trabajo fue establecer las condiciones de inmunopurificación de la
proteína CchDINGp39kDa a partir de la fracción G10P17.57. de Capsicum chinense Jacq y evaluar su actividad antimicrobiana y de fosfatasa. Se implementó
una nueva metodología de purificación para la proteína CchDINGp39kDa, por medio
de inmunoprecipitación mediante el anticuerpo COM2 (anti CchDINGp39kDa) y su
conjugación a proteína A-perlas de agarosa.
La proteína CchDINGp39kDa se purificó en su estado desnaturalizado con el
anticuerpo policlonal COM2. El proceso de inmunopurificación implementado en
este trabajo optimizó en tiempo y concentración la recuperación de la proteína a partir de la fracción
G10P1.7.57. Bajo las condiciones de este
trabajo no se logró la óptima renaturalización de CchDINGp39kDa y por ello solo
se recuperó una parte de su actividad de fosfatasa y poco o nada de su
actividad inhibitoria del crecimiento de Xanthomonas
campestris. Esta nueva metodología ofrece una simplificación del proceso de
purificación de CchDINGp39kDa. Sin embargo, para recuperar las características
biológicas de la proteína, esta se sometió a un tratamiento de renaturalización
que no fue eficiente. Esto pudiera
optimizarse si se manejaran mayores concentraciones del amortiguador o utilizado
otro protocolo de
renaturalización con otros amortiguadores. Además de este hecho, como se mostró
en los resultados el proceso de elución, fue poco eficiente para recuperar
cantidades considerables de la proteína, esto pudiera ser otro factor
importante por el cual no se obtuvo respuesta en los análisis posteriores. Para
complementar los estudios realizados, se sugiere optimizar el nuevo protocolo
para la elución y renaturalización de la
proteína CchDINGp39kDa.
Asesora externa: MC. Ligia Guadalupe Brito
Argáez (Centro de
Investigación Científica de Yucatán, A.C)
Asesor interno: Dr. Gabriel Lizama Uc
Revisores: Dr. Jorge Abraham Tamayo Cortes
Ing. José Luis Giorgana Figueroa
Dra. María de Lourdes Vargas y Vargas
Para citar:
Morales Couoh, L.M. (2015) Inmunopurificación de una proteína ding de chile habanero (Capsicum chinense) [CD-ROM
Tesis Profesional. Instituto Tecnológico de Mérida. Mérida, Yucatán,
México. Publicada 28 de abril de 2015.