Regeneración de plantas a partir de raíces transformadas de hipocótilo y hoja de Pentalinon andrieuxii Müll. Arg. (Bejuco)

Celebramos la titulación de la  nueva colega…

Jarely Amayrani Canul Ek

Ingeniera Bioquímica

“Regeneración de plantas a partir deraíces transformadas de hipocótilo y hoja de Pentalinon andrieuxii Müll. Arg. (Bejuco)”

Tesis Profesional

Resumen:

Se evaluó el efecto de varias concentraciones del regulador de crecimiento Thidiazurón (TDZ) en un rango de 0-25 µM en las raíces transformadas inducidas a partir de hipocótilo de Pentalinon andrieuxii en medio PC-L2 semisólido y líquido para la obtención de brotes. Como respuesta se obtuvo que a la concentración de 16.25 µM se forman brotes a los 9 meses, (7 meses en TDZ+2 meses en PC-L2 semisólido; también a los 9 meses en TDZ), el experimento en PC-L2 líquido no tuvo éxito, se inhibieron y fenolizaron las raíces, además de que a concentraciones a partir de 13.25 µM las raíces crecen individualmente. También el TDZ+PCIB en PC-L2 semisólido no tuvo éxito porque inhibió el crecimiento de las raíces y cuando formó callos se terminaron fenolizando ocasionando su muerte. Durante la resiembra de las raíces transformadas se observó la regeneración espontánea de los brotes, por lo que pasando 2 a 3 semanas dichos brotes se pasaron a medio PC-L2 semisólido libre de reguladores de crecimiento; los brotes obtenidos de la organogénesis directa e indirecta se resembraron cada 4 semanas, se enraizaron con ácido indol butírico (AIB) en la concentración de 1 µM. Las plantas se adaptaron en macetas con los sustratos tierra-agrolita (1:1). También se realizó la extracción de ADN vegetal (raíces transformadas) de acuerdo al protocolo de Dellaporta et al., (1983) realizándole algunas modificaciones; después se realizó la PCR (Reacción en Cadena de la Polimerasa) para identificar la presencia del gen rolA, tanto para el ADN de las células bacterianas (Agrobacterium rhizogenes cepa ATCC15834), como de los brotes regenerados a partir de las raíces transformadas obtenidas a partir de hoja y de hipocótilo de Pentalinon andrieuxii. Debido a que no se cuenta con un invernadero para plantas transformadas con las condiciones adecuadas; las plantas adaptadas a macetas se encuentran en un cuarto de cultivo de adaptación con períodos de luz 18-6hrs. Estas plantas se regaron cada tercer día de la semana

Asesor externo: M. en C. Gregorio Godoy Hernández: CICY

Asesor interno: Dr. Gabriel Lizama Uc

Revisores: Dr. Carlos Francisco Reyes Sosa

                    Ing. José Luis Giorgana Figueroa

                    Dr. Luis Alfonso Rodríguez Gil

Para citar:

Canul Ek, J.A. (2015) Regeneraciónde plantas a partir de raíces transformadas de hipocótilo y hoja de Pentalinonandrieuxii Müll. Arg. (Bejuco) [CD-ROM]. Tesis Profesional. Instituto Tecnológico de Mérida. Mérida, Yucatán, México.  Publicada 11 de febrero de 2015