jueves, 14 de mayo de 2015

Establecimiento de un protocolo de micropropagación de crisantemo (Dendranthema grandiflora) VAR. Micromargara

Celebramos la titulación del  nuevo colega…

Gerardo Gaspar Tun Góngora
Ingeniero Bioquímico

Tesis Profesional


Resumen:

El objetivo del presente proyecto fue establecer un protocolo de micropropagación de Crisantemo (Dendranthema grandiflora) var. Micromargara. Para lo cual se  evaluaron  distintos tratamientos para la propagación clonal in vitro a partir de nudos con yemas axilares; así como dos condiciones de incubación para la inducción de morfogénesis en hoja e hipocotilo; se evalúo el efecto de uso combinado de AIA y BAP y de ANA y BAP para la inducción de la morfogénesis; se aplicaron tratamientos con frío para mejorar la respuesta en la regeneración y caracterizar histológicamente las estructuras morfogénicas obtenidas en hipocotilo y explantes. Se logró inducir la organogénesis de brotes en explantes de hoja en condiciones de fotoperíodo en un 33% de los explantes a los 20 días de inducción. La elongación y enraizamiento de los brotes inducidos en explantes foliares se logró en el mismo tratamiento de inducción. El uso combinado de los reguladores de crecimiento AIA y BAP para la inducción de la morfogénesis, no proporcionó los resultados esperados, tanto en los explantes de hoja, como en los explantes de hipocotilo, en ambas condiciones de incubación. La combinación de los reguladores de crecimiento ANA y BAP a una concentración de 4.83μM y 13.5μM respectivamente, fue el mejor tratamiento para inducir la regeneración. El efecto de aplicar estrés mediante el frío para inducir la regeneración en Crisantemo no fue necesario, ya que se tuvo respuesta en explantes de hoja en fotoperíodo a los 20 días, antes de ingresar a refrigeración. Se logró observar estructuras morfogénicas en los cortes histológicos realizados a explantes de hojas e hipocotilo del tratamiento C1, que fue el tratamiento que mejor resultado mostró en el proceso de regeneración in vitro, y que posiblemente puedan ser la formación de órganos nuevos, es decir, que se esté llevando a cabo una organogénesis en los explantes analizados. Los colorantes utilizados en la tinción de los tejidos, fueron los adecuados, ya que con ellos, se logró teñir las paredes celulares (color azul) de los núcleos (color rosa) de las células vegetales, observando así el proceso de división, y aglomeración de las células. Se observó que en los 5 tratamientos diseñados para generar plantas completas para propagar clonalmente, se logró la formación de plantas completas, pero el mejor tratamiento fue el tratamiento 205 (MS 0.33g, BAP 2.2 μM, pH de 5.8) ya que en ese tratamiento se obtuvo una mayor tasa de elongación del tallo, sobrevivencia de los explantes y enraizamiento de los explantes, por lo cual, se concluye que en el tratamiento 205, se obtuvo una respuesta significativa con respecto al resto de los tratamientos.

Asesora Externa: Dra. Guadalupe López Puc
Asesor interno: Dr. Carlos Francisco Reyes Sosa
Revisores: Ing. José Luis Giorgana Figueroa
                    Dra. Sara Luz Nahuat Dzib
                    MC. Sara Alicia González Novelo

Para citar:

Tun Góngora, G.G. (2015) Establecimiento de un protocolo de micropropagación de crisantemo (Dendranthema grandiflora) VAR. Micromargara [CD-ROM]. Tesis Profesional. Instituto Tecnológico de Mérida. Mérida, Yucatán, México.  Publicada 14 de mayo de  2015.

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